Située à l'intérieur des musées du Vatican, la bibliothèque apostolique est l'une des plus grandes de Rome, sinon d'Italie. L'histoire très ancienne de cette bibliothèque commence au XVe siècle avec le pape Nicolas V, qui voulait que les codes latins, grecs et hébreux en sa possession soient rendus publics. Son projet fut ensuite étendu par Sixte IV avec la promulgation de la bulle Ad decorem militantis Ecclesiae, puis par Léon X et Paul V. Entre 1587 et 1589, lorsque le siège initial ne pouvait plus contenir le matériel en constante augmentation, Sixte V décida de faire construire un nouveau siège et confia le projet à l'architecte Domenico Fontana. Le bâtiment, qui abrite encore aujourd'hui la bibliothèque, a été construit sur les escaliers de séparation qui reliaient la cour du Belvédère à celle que l'on appelle aujourd'hui la cour de la Bibliothèque. À l'intérieur, au dernier étage, se trouve le grandiose salon Sixtin, une grande pièce qui sert de salle de lecture, richement décorée de grotesques dans les voûtes et de vues de Rome avec les monuments les plus célèbres à la base des voiles et dans les lunettes aux extrémités des deux nefs. À l'heure actuelle, la Bibliothèque du Vatican conserve un patrimoine très riche composé d'environ 180 000 volumes manuscrits et d'archives, 1 600 000 livres imprimés, environ 9 000 incunables, 300 000 pièces de monnaie et médailles, plus de 150 000 imprimés, des milliers de dessins et de matrices, et plus de 200 000 photographies. Parmi les pièces les plus célèbres de la bibliothèque, citons le «Codex Vaticanus», le plus ancien manuscrit complet de la Bible connu, la Bible de Gutenberg, le «Sidereus Nuncius» de Galilée, la bulle papale Antiquorum habet fida relatio avec laquelle le pape Boniface VIII a proclamé le premier jubilé en 1300 et la pièce d'or placée par Charlemagne sur le tombeau de Saint-Pierre en 781.