Ao lado da Basílica de Santa Maria das Graças, o antigo refeitório do convento dominicano tornou-se um museu dedicado à "Última Ceia" ou "Cenáculo", pintada aqui por Leonardo da Vinci entre 1494 e 1497-98 por vontade de Ludovico, o Mouro: uma obra-prima famosa em todo o mundo, uma iconografia que se tornou parte do imaginário coletivo ocidental. Portanto, juntamente com a basílica, desde 1980, o Cenacolo Vinciano está incluído na lista do Património Mundial da UNESCO. A obra impressiona pelo seu grande tamanho, pela perfeição do cenário em perspetiva e pela extraordinária eficácia na representação dos estados de espírito dos apóstolos, que reagem cada um à sua maneira, de acordo com a sua personalidade, à notícia da traição de Jesus. Leonardo criou a "Última Ceia" a seco sobre duas camadas de gesso, usando uma técnica mista inovadora que, ao contrário do fresco, permitia retoques contínuos, mas que logo se revelou instável. A humidade da sala, os assentamentos da parede, os restauros sumários realizados ao longo dos séculos tornaram a obra quase ilegível, recuperada apenas graças a um trabalho meticuloso que durou de 1977 a 1999. Para preservar a pintura, que permanece frágil, as visitas são estritamente regulamentadas: o acesso é apenas por marcação e a permanência no interior não pode exceder 15 minutos. Na parede em frente à "Última Ceia" há um fresco de uma "Crucificação" de Donato Montorfano, um pouco anterior: Leonardo integrou-o, provavelmente a pedido de Ludovico, o Mouro, acrescentando os retratos dos duques de Milão e dos seus filhos, que se perderam quase completamente.